产品详情
【产品名称】
通用名称:人唾液皮质醇(SC)定量检测试剂盒(ELISA)
英文名称:Human salivary cortisol ELISA KIT
【包装规格】
96T/48T
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液中唾液皮质醇(SC)的浓度。
【检验原理】
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记SC,纯化的抗SC抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物素标记SC及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物素标记的SC结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记的SC结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化SC,再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物素化SC-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着SC浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中SC的减少或升高有可靠的检出性能。
【主要组成成分】
主要成分
组分 |
数量 |
主要成分 |
校准品 |
0.5ml/管*6管 |
抗原配制的6个浓度标准品 |
包被微孔板 |
96T/48T |
预包被固相抗体 |
HRP标记抗体 |
6mL |
HRP标记的检测抗体 |
生物素化抗原 |
6mL |
检测抗原 |
底物液A |
6mL |
过氧化脲工作液 |
底物液B |
6mL |
TMB工作液 |
终止液 |
6mL |
2mol/L稀释液 |
20×浓缩洗涤液 |
30mL |
含0.15%Tween20的PBS |
说明书 |
1份 |
-- |
自封袋 |
1个 |
-- |
不干胶 |
2片 |
-- |
标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0 nmol/L
本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。
2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后,按照建议的条件保存,校准品、包被微孔板和HRP标记抗体,有效期为14天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
【适用仪器】
半自动的酶标仪,如Thermo MK3,或者国产酶标仪。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清:4000rpm条件下离心20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下,离心20分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。
4、组织匀浆:用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000prm转速离心5-10分钟,取上清检测。
样本保存和稳定性
样本在2-8℃条件下,可以储存72h,或者在- 20℃储存6个月。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前,所有的组分都要至少复温30min,确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。