产品详情
【产品名称】
通用名称：人唾液皮质醇（SC）定量检测试剂盒（ELISA）
英文名称：Human salivary cortisol ELISA KIT
【包装规格】
96T/48T
【预期用途】
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液中唾液皮质醇（SC）的浓度。
【检验原理】
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记SC，纯化的抗SC抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记SC及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的SC结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的SC结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化SC，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化SC-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着SC浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中SC的减少或升高有可靠的检出性能。
【主要组成成分】
主要成分
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组分 |
数量 |
主要成分 |
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校准品 |
0.5ml/管*6管 |
抗原配制的6个浓度标准品 |
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包被微孔板 |
96T/48T |
预包被固相抗体 |
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HRP标记抗体 |
6mL |
HRP标记的检测抗体 |
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生物素化抗原 |
6mL |
检测抗原 |
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底物液A |
6mL |
过氧化脲工作液 |
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底物液B |
6mL |
TMB工作液 |
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终止液 |
6mL |
2mol/L稀释液 |
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20×浓缩洗涤液 |
30mL |
含0.15%Tween20的PBS |
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说明书 |
1份 |
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自封袋 |
1个 |
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不干胶 |
2片 |
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标准品浓度依次为：48、24、12、6、3、0 nmol/L
本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
【适用仪器】
半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在4000rpm条件下，离心20分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。
4、组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M，pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1: 9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液5000prm转速离心5-10分钟，取上清检测。
样本保存和稳定性
样本在2-8℃条件下，可以储存72h，或者在- 20℃储存6个月。样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
试剂准备
1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
