产品详情
【货 号】YKE10240
【产品名称】
通用名称:人基质金属蛋白酶13 (MMP-13)定量检测试剂盒(ELISA)
英文名称:Human matrix blloproteinase 13(MMP-13) ELISA kit
【包装规格】
96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中MMP-13的浓度。
【检测原理】:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 MMP-13 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 MMP-13与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 (streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中 MMP-13的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长测定吸光度值。
【主要组成成分】
主要成分
组分 |
规格 |
数量 |
包被微孔板 |
96T |
1板 |
标准品 |
4000pg/mL |
2管 |
抗体 |
80uL |
1管 |
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 |
150uL |
1管 |
10×检测缓冲液 |
5mL |
1瓶 |
标准品稀释液 |
5mL |
1瓶 |
TMB显色液 |
10mL |
1瓶 |
TMB终止液 |
10mL |
1瓶 |
洗涤缓冲液(20X) |
30ml |
1瓶 |
封板膜 |
|
4张 |
注意:使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致
【样本要求】
样本类型和采集
细胞培养上清
300 g 离心 10 分钟去除沉淀物,即刻检测, 或者分装,-20℃以下贮存。
血清样本
分离管分离血清。在 1000 g 离心之前,使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或 者分装,-20℃以下贮存。
血浆样本
EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。1000 g 离心 3 0 分钟收集样本。即刻检测,或者 分装,-20℃以下贮存。 本试剂盒可能适用于其它生物学样本。
细胞培养上清、血清和血浆已经过验证。
注意:检测前,样本中可见的沉淀必须去除。不要使用严重溶血或高血脂的样本。 样本应分装并贮存于-20℃,以避免人MMP-13活性的丢失。如果在 24 小时内检测,样本可以 存放在 2 - 8℃。 避免样本的反复冻融。在检测前,冷冻样本应该缓慢地恢复至室温,轻柔地混匀。
【检验方法】
试剂准备
检测前请将所有的试剂、样本恢复至室温。 如果浓缩的试剂出现结晶,37℃温浴,直至结晶全部溶解。
1×洗液
吸取 20×浓缩洗液 30 ml 至 1 L 的量筒,加蒸馏水或去离子水至600 ml,轻轻混匀,避免泡 沫。 转移至干净瓶内。2 - 25℃贮存,1×洗液可稳定 30 天。
1×检测缓冲液
吸取 10×浓缩检测缓冲液 5 ml 至 100 ml 量筒,加蒸馏水或去离子水至 50 ml,轻轻混匀,避 免泡沫。 2 - 8℃贮存,1×检测缓冲液可稳定保存 30 天。
检测抗体 稀释前充分混匀。根据标准品和待测样本的数量,用 1×检测缓冲液按 1:100 稀释浓缩的检 测抗体。 注意:请在 30 分钟内使用稀释后的检测抗体。
辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素
稀释前充分混匀。 根据标准品和待测样本的数量,用 1×检测缓冲液按 1:100 稀释浓缩的辣根过氧化物酶标记的 链霉亲和素。 注意:请在 30 分钟内使用稀释后的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。